【摘 要】
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目的 探讨粗壮女贞提取物体外不同作用方式下抗甲型流感病毒的作用及机制.方法 以狗肾上皮(Madin-Darby Canine Kidney,MDCK)细胞建立甲型H1N1流感病毒感染模型,采用粗壮女贞提取物对MDCK细胞最大无毒浓度(0.8 mg/ml)进行实验,CCK-8法测定提取物预防式、治疗式和共同式干预下MDCK细胞存活率;荧光定量PCR法、间接免疫荧光法检测预防式干预下细胞内病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)基因表达、蛋白定位;荧光法检测病毒神经氨酸酶(neuraminidase,N
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院/华西第四医院,四川成都610041;食品安全监测与风险评估四川省重点实验室;四川省疾病预防控制中心
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目的 探讨粗壮女贞提取物体外不同作用方式下抗甲型流感病毒的作用及机制.方法 以狗肾上皮(Madin-Darby Canine Kidney,MDCK)细胞建立甲型H1N1流感病毒感染模型,采用粗壮女贞提取物对MDCK细胞最大无毒浓度(0.8 mg/ml)进行实验,CCK-8法测定提取物预防式、治疗式和共同式干预下MDCK细胞存活率;荧光定量PCR法、间接免疫荧光法检测预防式干预下细胞内病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)基因表达、蛋白定位;荧光法检测病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)荧光强度;ELISA法测定细胞内炎症因子IL-6、IL-8、IFN-γ、IP-10表达水平.结果 与病毒对照组相比,治疗式、共同式干预下实验组细胞存活率差异无统计学意义(q =2.658,P＞0.05;Z=1.547,P＞0.05);预防式干预下,实验组中细胞存活率上升(Z=4.195,P＜0.001),病毒NP多定位于细胞核内,且基因表达下降(Z=-2.662,P＜0.05);NA活性降低(Z=-2.405,P＜0.05);IL-6(Z=-2.772,P＜0.05)、IL-8(q =8.493,P＜0.001)和IFN-γ(Z=-2.863,P＜0.05)蛋白表达量下降.结论 预防式干预下粗壮女贞提取物具有抗甲型H1N1流感病毒作用,其机制可能与干扰病毒NP功能、抑制NA活性以及减轻炎症反应有关.
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