【摘 要】
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为评估顶膜抗原1(AMA1)对柔嫩艾美耳球虫感染的免疫保护效果,试验提取纯化了柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊总RNA,利用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫AMA1基因(EtAMA1)膜外区片段.
【机 构】
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江苏农牧科技职业学院,江苏泰州225300;泰州职业技术学院,江苏泰州225300;德州市农业农村事业发展中心,山东德州253000
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为评估顶膜抗原1(AMA1)对柔嫩艾美耳球虫感染的免疫保护效果,试验提取纯化了柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊总RNA,利用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫AMA1基因(EtAMA1)膜外区片段.将EtAMA1基因膜外区片段克隆入pVAX1.0中,获得真核表达重组质粒pVAX-EtAMA1.用柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊人工接种雏鸡,考察接种前后雏鸡体重变化、肠道病变记分及排出卵囊的减少量,评估重组质粒pVAX-EtAMA1对柔嫩艾美耳球虫感染的免疫保护效果.结果表明:EtAMA1基因膜外区片段为1 281 bp,编码427个氨基酸.用pVAX-EtAMA1免疫后,各试验组之间的平均增重1差异不显著(P＞0.05),pVAX-EtAMA1质粒免疫试验组和非免疫感染对照组、非免疫非感染对照组之间平均增重2差异显著(P＜0.05),且pVAX-EtAMA1质粒免疫试验组盲肠病变记分、克盲肠内容物卵囊数均低于3个对照组,pVAX-EtAMA1质粒免疫试验组、pVAX1.0空质粒免疫感染对照组、非免疫感染对照组、非免疫非感染对照组的抗球虫指数分别为176.90,134.55,106.81,200.pVAX-EtAMA1质粒免疫试验组鸡体重显著增加(P＜0.05),盲肠损伤减轻,卵囊产量也明显下降.说明顶膜抗原1(AMA1)可对柔嫩艾美耳球虫感染提供一定的免疫保护力,并有望成为研制抵抗柔嫩艾美耳球虫野外感染疫苗的候选抗原.
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