棉铃虫单核衣壳核多角体病毒3个bro基因的原核表达与抗体制备

来源 :中国病毒学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：heartless850

【摘要】

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根据棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(HaSNPV)基因组全序列,设计引物,用PCR的方法扩增得到bro-a、bro-b和bro-c三个全长基因.将这三个基因的片段分别克隆至原核表达载体pProExHTb

【作者】

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陈明明吴东袁丽陈新文胡志红

【机构】

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中国科学院武汉病毒研究所

【出处】

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中国病毒学

【发表日期】

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2003年6期

【关键词】

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棉铃虫单核衣壳核多角体病毒克隆表达抗体 bro基因 Helicoverpa armigerd single-nucleocapsid nucleopoly

【基金项目】

：

国家自然科学基金，中国科学院知识创新工程项目，国家高技术研究发展计划(863计划)，国家重点基础研究发展计划(973计划)

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根据棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(HaSNPV)基因组全序列,设计引物,用PCR的方法扩增得到bro-a、bro-b和bro-c三个全长基因.将这三个基因的片段分别克隆至原核表达载体pProExHTb,经IPTG诱导,在E.coli DH50菌株中得到了目的基因的高效表达.表达的目的蛋白大小分别为32kDa、64kDa和58kDa,经SDS-PAGE分离纯化,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体.抗体经1:2500倍稀释后用于WestemBlot分析,获得特异性显色信号,所制备的三种抗体适合用作bro基因的功能

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