论文部分内容阅读
目的 探讨γ-干扰素(IFN-γ)对Fas配体(FasL)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的促进作用和机制.方法 体外培养大鼠VSMCs,给予IFN-γ、FasL单独处理或两者联合处理后,采用Western blot、流式细胞学分析、Hoechst 33342染色等技术,检测IFN-γ对VSMCs凋亡、Fas表达和分布的影响.观察衣霉素预处理是否影响IFN-γ联合FasL诱导的VSMCs凋亡,探讨Fas膜转位在IFN-γ促进FasL诱导VSMCs凋亡中的作用.结果 体外条件下,Hoechst 33342染色显示,IFN-γ和FasL单独处理的凋亡诱导作用均较弱[凋亡率为(7.4±1.9)％、(6.8±2.5)％],与前者比较,IFN-γ联合FasL可显著诱导VSMCs凋亡[凋亡率为(20.1±2.2)％,P＜0.01].Western blot结果显示,经IFN-γ处理36、72 h后VSMCs总的Fas蛋白表达水平,相对表达量分别为0.469±0.129、0.383±0.045,与磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(0.402 ±0.031)比较差异无统计学意义(P＞0.05),但可以诱导细胞表面Fas增多(0.266±0.042比0.042±0.017,P＜0.01)而细胞内Fas减少(0.193±0.038比0.426±0.074,P＜0.01).膜转运阻断剂衣霉素预处理可有效抑制IFN-γ和FasL联合处理诱导的VSMCs凋亡,凋亡率[(6.1±0.8)％]较对照组[(23.0±1.0)％]显著降低(P＜0.01).流式细胞学分析结果亦证实Hoechst染色结果.结论 IFN-γ通过诱导Fas受体膜转位,显著增强VSMCs对FasL的敏感性,促进VSMCs凋亡。