评价自噬在氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤中的作用。

常规培养小鼠RAW264.7细胞，采用随机数字表法分为4组(n＝6)：对照组(Con组)、LPS组、LPS＋氢组(LPS＋H₂组)和LPS＋氢＋自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS＋H₂＋3-MA组)。LPS组给予终浓度为1 μg/ml的LPS孵育6 h；LPS＋H₂组给予终浓度为1 μg/ml的LPS和浓度为0.6 mmol/L的含氢培养液孵育6 h；LPS＋H₂＋3-MA组先给予终浓度为2 mmol/L的3-MA孵育1 h，然后给予终浓度为1 μg/ml的LPS和浓度为0.6 mmol/L的含氢培养液孵育6 h。采用Clark氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR)，采用JC-1法测定线粒体膜电位(MMP)，透射电镜下计数自噬体，采用Western blot法测定细胞PTEN诱导的蛋白激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和Beclin-1的表达。

与Con组比较，LPS组RCR和MMP降低，PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调，自噬体计数升高(P<0.05)；与LPS组比较，LPS＋H₂组RCR和MMP升高，PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调，自噬体计数升高(P<0.05)；与LPS＋H₂组比较，LPS＋H₂＋3-MA组RCR和MMP降低，PINK1、Parkin、LC3Ⅱ和Beclin-1表达下调，自噬体计数降低(P<0.05)。

自噬增强参与了氢减轻LPS致小鼠巨噬细胞线粒体损伤。