【摘 要】
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目的探讨miR-181靶向调控线粒体融合基因Mfn1表达,对结肠癌细胞增殖的影响。方法通过生物信息学预测,线粒体融合基因Mfn1为miR-181的特异性靶基因。实时定量PCR方法检测miR-1
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第二医院结直肠肿瘤外科,哈尔滨医科大学大肠癌研究所
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目的探讨miR-181靶向调控线粒体融合基因Mfn1表达,对结肠癌细胞增殖的影响。方法通过生物信息学预测,线粒体融合基因Mfn1为miR-181的特异性靶基因。实时定量PCR方法检测miR-181对Mfn1基因表达的影响,Western blot方法检测miR-181对Mfn1蛋白表达的影响。采用MTT法及流式细胞术检测转染miR-181对HCT116细胞增殖的影响。电镜技术观察转染miR-181对线粒体形态的影响、ATP检测试剂盒检测miR-181对结肠癌细胞线粒体功能的影响。结果 qRT-PCR及Western blot结果显示miR-181抑制了Mfn1的表达;转染miR-181后,HCT116细胞生长受到抑制,且发生了细胞周期G1/S期阻滞;miR-181过表达后,HCT116细胞的线粒体形态发生了改变,线粒体融合减少、裂变增多,且细胞ATP含量明显下降。结论 miR-181负性靶向调控Mfn1的表达、影响线粒体融合-分裂稳态,从而抑制结肠癌HCT-116细胞的增殖。
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