使用FLAG标签肽及慢病毒载体共同筛选小鼠foxp3基因RNA干扰的有效靶点

来源 :中山大学学报:医学科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:loveandlove
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【目的】筛选高效的foxp3 RNA干扰的靶点用于阻断CD4^+CD25^+ Treg细胞的免疫抑制功能。【方法】使用oligoengine软件设计foxp3基因shRNA序列,化学合成法合成4条shRNA序列,构建含foxp3的靶序列的慢病毒载体:构建出表达FLAG融合蛋白和目的基因的工具细胞293T细胞用于筛选RNA干扰的有效靶点。【结果】成功包装了4条foxp3基因靶序列相应的慢病毒颗粒;成功构建了表达融合蛋白和目的基因的293T工具细胞:在工具细胞上筛选出了2条RNAi效率分别为91.3%和95.
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