【摘 要】
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目的:构建黑色素浓集激素受体2(MCHR2)真核表达载体pcDNA3.1(+)MCHR2,转染SHG-44细胞,建立稳定、高效表达人MCHR2的SHG-44细胞系。方法:PCR法从人胎脑eDNA文库扩增MCHR2全长cDNA片段。用
【机 构】
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重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金(30671008),重庆市自然科学基金重点项目(CSTC2007BA5012),国家外专局项目(20075000019).
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目的:构建黑色素浓集激素受体2(MCHR2)真核表达载体pcDNA3.1(+)MCHR2,转染SHG-44细胞,建立稳定、高效表达人MCHR2的SHG-44细胞系。方法:PCR法从人胎脑eDNA文库扩增MCHR2全长cDNA片段。用基因重组方法将其克隆到pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)MCHR2,并用Lipofectamine^TM转染到SHG-44细胞,通过G418筛选,建立稳定表达MCHR2的SHG-44细胞系,用RT—PCR、Western印迹及免疫荧光法检测MCHR2
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