探讨不同频次的高压氧预处理对大鼠皮瓣移植术后存活率及缺血再灌注损伤的影响,初步探索提高移植术后皮瓣存活率的最佳预处理条件。
方法将36只SD大鼠按照随机数字表法分为4组,每组9只。分别于术前对4组大鼠予以高压氧预处理0、2、4、6 d,即对照组、预处理2 d组、预处理4 d组、预处理6 d组。以大鼠背部正中线为轴,设计切取1个蒂在尾端且距髂后上棘约1 cm的超长随意皮瓣,大小为10.0 cm×2.5 cm。大体观察各组术后皮瓣成活情况,并测定术后第7天皮瓣最终的存活面积及存活率。术后第7天在距皮瓣蒂部5 cm处进行组织取材,行组织病理学观察;采用免疫组织化学法检测皮瓣组织中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量水平,计算各组阳性细胞表达率;以免疫荧光技术检测白细胞介素-6(IL-6)在皮瓣组织中的表达情况。采用方差分析对各组测量值进行比较,以P<0.05为差异有统计学意义。
结果术后第7天,各高压氧预处理组的大鼠移植皮瓣存活面积和存活率均明显高于对照组(P<0.05),且预处理4 d组及6 d组明显高于预处理2 d组(P<0.05),但预处理4 d组与6 d组间差异无统计学意义(P=0.095)。术后第7天病理学观察,对照组出现部分坏死灶,预处理2 d组炎症细胞较多血管结构较少,预处理4 d组可见较多新生血管,预处理6 d组炎症细胞最少,新生血管情况同预处理4 d组。对照组SOD的吸光度A值为0.009 7±0.000 3,其阳性表达率为20%,显著低于各高压氧预处理组,差异具有统计学意义(P<0.05)。而对照组MDA的吸光度A值为0.055 1±0.003 0,其阳性表达率为55%,显著高于各高压氧预处理组,差异具有统计学意义(P<0.05)。其中,预处理2 d组的SOD吸光度A值为0.023 8±0.003 0,阳性表达率为30%,低于预处理4 d组(吸光度A值0.046 9±0.003 0,阳性表达率35%)和6 d组(吸光度A值0.047 2±0.003 6,阳性表达率40%),而预处理2 d组的MDA吸光度A值为0.037 2±0.003 2,阳性表达率30%,均高于预处理4 d组(吸光度A值0.014 7±0.002 4,阳性表达率5%)和6 d组(吸光度A值0.017 0±0.001 8,阳性表达率10%),差异均具有统计学意义(P<0.05)。但预处理4 d组与预处理6 d组相比,SOD及MDA的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。IL-6在各高压氧预处理组中的表达均显著低于对照组(吸光度A值44.937 0±0.594 0),差异具有统计学意义(P<0.05),其中预处理2 d组中的吸光度A值为41.698 0±0.724 0,明显高于预处理4 d组(吸光度A值34.049 0±0.323 0)及6 d组(吸光度A值33.524 0±0.639 0),差异具有统计学意义(P<0.05),但预处理4 d组的表达与6 d组相比,差异无统计学意义(P=0.068)。
结论高压氧预处理能明显促进大鼠皮瓣移植术后的存活,且术前每日1次,连续4 d的高压氧预处理,更能增强皮瓣组织对缺血缺氧的耐受,减轻组织的缺血再灌注损伤。