目的建立胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因 T833C、G919A 点突变的等位基因特异-荧光定量 PCR(TaqMan-ARMS)测定方法,探讨2型糖尿病肾病患者 CBS 基因 T833C、G919A 点突变率及与糖尿病肾病(DN)的相互关系。方法采用 PCR 时引物3′端错配扩增阻滞(ARMS)原理,结合荧光定量 PCR 技术(TaqMan 探针),制备野生和突变质粒标准品,建立野生引物和突变引物2个反应体系,根据荧光定量 PCR 时野生引物循环阈值(Wct)与突变引物循环阈值(Mct)的比值Δct(Δct=Wct/Mct)及扩增有无指数增长期出现,建立点突变等位基因型的判定标准,并对94例 DN 患者(组1)和140例尿微量白蛋白正常的非糖尿病对照者(组2)的 CBS 基因 T833C、G919A 点突变进行检测。结果建立的 TaqMan-ARMS 方法检测 T833C 野生等位基因型的判定标准为Δct<0.72或 Mct>40,杂合突变型为0.9<Δct<1.10,纯合突变型为1.40<Δct或 Wct>40;G919A 野生等位基因型判定标准为Δct<0.74或 Mct>40,杂合突变型为0.92<Δct<1.03,纯合突变型为1.26<Δct或 Wct>40。T833C 点突变 TT、TC、CC 3种基因型在 DN 组分布频率分别为98.94%、1.06%和0,组2中分别是99.29%、0.71%和0;两组人群833C 等位基因频率分别为0.53%和0.36%,基因型和等位基因频率差异均无统计学意义。各组中未发现 G919A 等位基因杂合突变和纯合突变型。结论成功建立了测定 CBS 基因 T833C、G919A 点突变的 TaqMan-ARMS 方法,该方法准确、特异,适合高通量点突变的检测。本研究未观察到 CBS 基因 T833C、G919A 点突变为 DN 的遗传危险因素。