为建立一种检测塞内卡病毒VP2蛋白的间接ELISA方法，本试验将A型塞内卡病毒 (SVA) VP2蛋白作为抗原包被酶标板，采用棋盘式方法优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量，同时对间接ELISA方法的其他反应条件进行了筛选。结果显示，VP2蛋白包被量为2 μg/mL（1∶1 000稀释）；用2% BSA封闭液稀释标准阳性血清为1∶20；二抗做1∶5 000稀释；TMB底物显色液室温避光显色反应10 min。特异性试验结果显示，同FMDV、PRRSV、CSFV、PRV和APP阳性血清均无交叉反应。此方法对塞内卡病毒阳性血清的敏感性为1∶160。批间、批内重复性试验结果的变异系数均小于10%。对200份猪血清样本分别进行间接荧光抗体免疫方法和间接ELISA方法的检测，结果符合率为95.5%。上述结果表明，该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可用于塞内卡病毒血清抗体检测和流行病学调查。