具有抗氧化功能的益生菌菌株筛选及其对丙烯酰胺诱导肠上皮细胞氧化损伤的保护作用研究

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目的:以DPPH清除率为指标,筛选抗氧化能力强的乳杆菌,并研究其对模拟胃肠道环境的耐受性及对丙烯酰胺(acrylamide,AA)所致肠上皮细胞氧化损伤的保护作用。方法:以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)清除率为指标,筛选得到清除率高的2株乳杆菌GBE17和GBE29,并进行16s rDNA测序鉴定。构建AA诱导的Caco-2氧化损伤模型,通过形态学观察和测定细胞培养上清液、细胞裂解液中的抗氧化物相关物质及酶活,评价其不同处理方式对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。并分别测定其在pH3.0、2.5及胆盐浓度为0.05%、0.1%环境下处理1-4h的活菌数变化。结果:植物乳杆菌GBE17和唾液乳杆菌GBE29发酵上清液的DPPH清除率分别为89.44%、79.24%。GBE17的治疗组与干预组和GBE29的干预组均可降低乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的释放,提高细胞内外超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性。两株乳杆菌在pH3.0和胆盐量0.1%的环境下处理4h,存活数均高于10~7 CFU/mL。结论:植物乳杆菌GBE17和唾液乳杆菌GBE29通过提高细胞内抗氧化酶系的活性,从而有效地降低AA诱导肠上皮细胞的氧化损伤,且具有较好的胁迫耐受能力。
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