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摘 要：目的：建立HPLC法测定盐酸西替利嗪口腔崩解片有关物质的方法。方法：采用Phenomenex Luna C18（2）（4.6×250mm，5？m）色谱柱，以乙腈―水（20：80）（用磷酸调节pH值至1.8）为流动相A，乙腈―水（35：65）（用磷酸调节pH值至1.8）为流动相B；流速为1.0ml/min；检测波长为230nm；柱温为30℃。结果：该色谱条件下，盐酸西替利嗪与各杂质完全分离，辅料不干扰有关物质测定。结论：采用HPLC法测定盐酸西替利嗪口腔崩解片的有关物质，方法简便，结果准确可靠。
关键词：盐酸西替利嗪口腔崩解片 有关物质 高效液相色谱法
盐酸西替利嗪属于哌嗪类抗组胺药，是一种作用强而持久，选择性较高的H1受体阻断剂。能稳定肥大细胞，抑制组胺介导的早期变态反应，又能抑制炎症细胞移行及介质释放。本品无明显抗胆碱和抗5-HT的作用，中枢抑制作用较轻，不良反应轻微且作用较轻。用于季节性或常年性过敏性鼻炎、由过敏原引起的的荨麻疹及皮肤瘙痒，但其苦涩味较重。山东方明药业集团股份有限公司研制的口腔崩解片解决了常规加甜味剂与矫味剂掩味效果不理想的难题，亦避免了肝脏的首过效应。同时为提高其生物利用度、方便老人、吞咽困难及取水不便者等特殊人员服用并迅速达到起效目的开辟了新途径。依文献[1]我们建立了高效液相色谱法（HPLC）对其有关物质进行测定，本方法准确可靠，可用于盐酸西替利嗪口腔崩解片的有关物质测定。
一、仪器与试药
岛津高效液相色谱仪（LC-20AT泵，SPD-20A紫外检测器）。盐酸西替利嗪口腔崩解片（自制，规格10mg，批号130223，130224，130225）；盐酸西替利嗪对照品（中国药品生物制品检定所，批号：10660-200401；），盐酸西替利嗪杂质A：（RS）-1- [（4 -氯苯基）苯甲基]哌嗪；盐酸西替利嗪杂质B：（RS）-2- [4 - [（4-氯苯基）苯甲基] -1-哌嗪基]乙酸；盐酸西替利嗪杂质G： 2- [4- [（RS）-（4-氯苯基）苯甲基] -1-哌嗪基]乙醇。乙腈为色谱纯；水为去离子水，其他试剂为分析纯。
二、方法与结果
1.色谱条件及系统适用性试验
用Phenomenex Luna C18（2）（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱；以乙腈-水（20：80）（用磷酸调节pH至1.8）为流动相A，以乙腈-水（35：65）（用磷酸调节pH至1.8）为流动相B，照下表1进行梯度洗脱；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；检测波长为230nm；进样量为20μl。
取盐酸西替利嗪、杂质A、杂质B及杂质G对照品适量，加流动相A溶解稀释制成每1ml含盐酸西替利嗪1mg及杂质A、杂质B、杂质G各5μg的溶液，取20μl进样，杂质A、G、B、盐酸西替利嗪依次出峰，杂质B与盐酸西替利嗪的分离度应不小于1.5。
2.溶液的配制
2.1供试品溶液 取本品的细粉适量（约相当于盐酸西替利嗪25mg），精密称定，置25ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
2.2对照溶液 精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀，即得。
2.3杂质对照品溶液 取盐酸西替利嗪杂质A、B、G对照品适量，精密称定，加流动相A溶解并稀释制成每1ml中各含 5μg的溶液，作为杂质对照品溶液。
2.4辅料对照溶液 按处方称取辅料适量（约相当于盐酸西替利嗪25mg），精密称定，置25ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
3.方法学考察
3.1 测定波长的选择 取盐酸西替利嗪适量加流动相A溶解制成每1ml含20μg的溶液。照紫外-可见分光光度法在200～400nm范围内进行扫描，结果本品在230nm波长处有最大吸收，参考BP2012年版盐酸西替利嗪片标准[1]中测定波长为230nm，确定本品的检测波长为230nm。
3.2 专属性考察
3.2.1 辅料干扰试验 取2.4项下辅料溶液、2.1项下供试品溶液和2.3项下杂质对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，结果辅料峰能与盐酸西替利嗪及各杂质峰完全分离，表明辅料不干扰有关物质测定。
3.2.2 破坏性试验 取样品适量，经酸、碱、氧化、高温、光照破坏后，按“1”项下色谱条件进行测定，记录色谱图。结果表明，本品在光照、氧化条件下容易降解，主峰与相邻杂质的分离度良好，本色谱条件对降解产物专属性良好。
3.3线性范围 精密称取盐酸西替利嗪对照品25mg，置25ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，作为贮备液，分别量取贮备液适量，用流动相A稀释成每1ml分别含0.205μg、2.05μg、3.075μg、10.25μg、15.375μg的溶液，分别量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积（A）为纵坐标，以浓度（C）为横坐标，进行线性回归，得回归方程：A=38278.8C+2819.2，r=0.99993（n=5），结果表明盐酸西替利嗪在0.205～15.375μg/ml浓度范围内线性关系良好。
3.4 精密度试验 取“2.2”项下对照溶液，连续测定，峰面积的RSD为0.81%（n=6）。
3.5 稳定性试验 照“2.1”项下方法制备供试品溶液，室温下在0、2、4、6、8小时分别测定。结果供试品溶液在室温条件下放置8小时，总杂质的RSD为5.6%，表明供试品溶液在室温条件下放置8小时内稳定性良好。
3.6 检测限 取盐酸西替利嗪对照品适量，用流动相溶解稀释至适当浓度，取20μl进样，使其主峰高约为噪音峰高的3倍，此时盐酸西替利嗪的进样浓度为0.024μg/ml，盐酸西替利嗪的检测限为0.48ng。
3.7耐用性
调整有关物质测试条件，分别考察流动相比例、流动相pH值、柱温变化、流速变化、检测波长变化及色谱柱变化时，测定结果的变化。在各条件下进样，供试品溶液杂质峰均能与主峰有效分离，故本色谱条件适合本品有关物质检查。
4.样品测定
按“2”项下方法配制各溶液，精密量取20μl，照“1”项下色谱条件，进行测定，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中扣除辅料峰后，按主成分自身对照法计算有关物质，见表2。
三、讨论
在建立色谱条件时，采用文献[2，3]中的方法，结果辅料对有关物质测定有干扰，采用BP2012年版盐酸西替利嗪片标准[1]，并作适当调整，结果盐酸西替利嗪与各杂质能完全分离，辅料对有关物质测定无干扰，本方法简单易行、灵敏度高、准确，可用于盐酸西替利嗪口腔崩解片的质量控制。
参考文献
[1] British Pharmacopoeia Commission. British Pharmacopoeia 2012.[S]. The Stationery Office，2012.
[2] 国家食品药品监督管理局.盐酸西替利嗪片进口药品注册标准（标准号：JX20050042）[S].北京：
[3] 张理星，孙建合等.盐酸左西替利嗪口腔崩解片的含量及有关物质测定[J].中国药业，2008，17（12）：47-48.
作者简介：付建，男，山东菏泽，助理工程师。
关键词：盐酸西替利嗪口腔崩解片 有关物质 高效液相色谱法
盐酸西替利嗪属于哌嗪类抗组胺药，是一种作用强而持久，选择性较高的H1受体阻断剂。能稳定肥大细胞，抑制组胺介导的早期变态反应，又能抑制炎症细胞移行及介质释放。本品无明显抗胆碱和抗5-HT的作用，中枢抑制作用较轻，不良反应轻微且作用较轻。用于季节性或常年性过敏性鼻炎、由过敏原引起的的荨麻疹及皮肤瘙痒，但其苦涩味较重。山东方明药业集团股份有限公司研制的口腔崩解片解决了常规加甜味剂与矫味剂掩味效果不理想的难题，亦避免了肝脏的首过效应。同时为提高其生物利用度、方便老人、吞咽困难及取水不便者等特殊人员服用并迅速达到起效目的开辟了新途径。依文献[1]我们建立了高效液相色谱法（HPLC）对其有关物质进行测定，本方法准确可靠，可用于盐酸西替利嗪口腔崩解片的有关物质测定。
一、仪器与试药
岛津高效液相色谱仪（LC-20AT泵，SPD-20A紫外检测器）。盐酸西替利嗪口腔崩解片（自制，规格10mg，批号130223，130224，130225）；盐酸西替利嗪对照品（中国药品生物制品检定所，批号：10660-200401；），盐酸西替利嗪杂质A：（RS）-1- [（4 -氯苯基）苯甲基]哌嗪；盐酸西替利嗪杂质B：（RS）-2- [4 - [（4-氯苯基）苯甲基] -1-哌嗪基]乙酸；盐酸西替利嗪杂质G： 2- [4- [（RS）-（4-氯苯基）苯甲基] -1-哌嗪基]乙醇。乙腈为色谱纯；水为去离子水，其他试剂为分析纯。
二、方法与结果
1.色谱条件及系统适用性试验
用Phenomenex Luna C18（2）（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱；以乙腈-水（20：80）（用磷酸调节pH至1.8）为流动相A，以乙腈-水（35：65）（用磷酸调节pH至1.8）为流动相B，照下表1进行梯度洗脱；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；检测波长为230nm；进样量为20μl。
取盐酸西替利嗪、杂质A、杂质B及杂质G对照品适量，加流动相A溶解稀释制成每1ml含盐酸西替利嗪1mg及杂质A、杂质B、杂质G各5μg的溶液，取20μl进样，杂质A、G、B、盐酸西替利嗪依次出峰，杂质B与盐酸西替利嗪的分离度应不小于1.5。
2.溶液的配制
2.1供试品溶液 取本品的细粉适量（约相当于盐酸西替利嗪25mg），精密称定，置25ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
2.2对照溶液 精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀，即得。
2.3杂质对照品溶液 取盐酸西替利嗪杂质A、B、G对照品适量，精密称定，加流动相A溶解并稀释制成每1ml中各含 5μg的溶液，作为杂质对照品溶液。
2.4辅料对照溶液 按处方称取辅料适量（约相当于盐酸西替利嗪25mg），精密称定，置25ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
3.方法学考察
3.1 测定波长的选择 取盐酸西替利嗪适量加流动相A溶解制成每1ml含20μg的溶液。照紫外-可见分光光度法在200～400nm范围内进行扫描，结果本品在230nm波长处有最大吸收，参考BP2012年版盐酸西替利嗪片标准[1]中测定波长为230nm，确定本品的检测波长为230nm。
3.2 专属性考察
3.2.1 辅料干扰试验 取2.4项下辅料溶液、2.1项下供试品溶液和2.3项下杂质对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，结果辅料峰能与盐酸西替利嗪及各杂质峰完全分离，表明辅料不干扰有关物质测定。
3.2.2 破坏性试验 取样品适量，经酸、碱、氧化、高温、光照破坏后，按“1”项下色谱条件进行测定，记录色谱图。结果表明，本品在光照、氧化条件下容易降解，主峰与相邻杂质的分离度良好，本色谱条件对降解产物专属性良好。
3.3线性范围 精密称取盐酸西替利嗪对照品25mg，置25ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，作为贮备液，分别量取贮备液适量，用流动相A稀释成每1ml分别含0.205μg、2.05μg、3.075μg、10.25μg、15.375μg的溶液，分别量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积（A）为纵坐标，以浓度（C）为横坐标，进行线性回归，得回归方程：A=38278.8C+2819.2，r=0.99993（n=5），结果表明盐酸西替利嗪在0.205～15.375μg/ml浓度范围内线性关系良好。
3.4 精密度试验 取“2.2”项下对照溶液，连续测定，峰面积的RSD为0.81%（n=6）。
3.5 稳定性试验 照“2.1”项下方法制备供试品溶液，室温下在0、2、4、6、8小时分别测定。结果供试品溶液在室温条件下放置8小时，总杂质的RSD为5.6%，表明供试品溶液在室温条件下放置8小时内稳定性良好。
3.6 检测限 取盐酸西替利嗪对照品适量，用流动相溶解稀释至适当浓度，取20μl进样，使其主峰高约为噪音峰高的3倍，此时盐酸西替利嗪的进样浓度为0.024μg/ml，盐酸西替利嗪的检测限为0.48ng。
3.7耐用性
调整有关物质测试条件，分别考察流动相比例、流动相pH值、柱温变化、流速变化、检测波长变化及色谱柱变化时，测定结果的变化。在各条件下进样，供试品溶液杂质峰均能与主峰有效分离，故本色谱条件适合本品有关物质检查。
4.样品测定
按“2”项下方法配制各溶液，精密量取20μl，照“1”项下色谱条件，进行测定，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中扣除辅料峰后，按主成分自身对照法计算有关物质，见表2。
三、讨论
在建立色谱条件时，采用文献[2，3]中的方法，结果辅料对有关物质测定有干扰，采用BP2012年版盐酸西替利嗪片标准[1]，并作适当调整，结果盐酸西替利嗪与各杂质能完全分离，辅料对有关物质测定无干扰，本方法简单易行、灵敏度高、准确，可用于盐酸西替利嗪口腔崩解片的质量控制。
参考文献
[1] British Pharmacopoeia Commission. British Pharmacopoeia 2012.[S]. The Stationery Office，2012.
[2] 国家食品药品监督管理局.盐酸西替利嗪片进口药品注册标准（标准号：JX20050042）[S].北京：
[3] 张理星，孙建合等.盐酸左西替利嗪口腔崩解片的含量及有关物质测定[J].中国药业，2008，17（12）：47-48.
作者简介：付建，男，山东菏泽，助理工程师。