【摘 要】
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目的:构建含人血红素加氧酶-1(HO-1)基因的重组pcDNA3.1质粒并进行鉴定。方法:利用分子生物学技术,从人肝脏标本中提取出RNA,进行RT—PCR后,做TA克隆,成功获得pMD/19-HO-1质粒,采用限制
【基金项目】
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江苏省卫生厅科技发展重点课题(H200514)
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目的:构建含人血红素加氧酶-1(HO-1)基因的重组pcDNA3.1质粒并进行鉴定。方法:利用分子生物学技术,从人肝脏标本中提取出RNA,进行RT—PCR后,做TA克隆,成功获得pMD/19-HO-1质粒,采用限制性内切酶BamHⅠ、EcoRⅠ从DMD/19.HO-1质粒中将目的基因片段切出,克隆到质粒pcDNA3.1的相应酶切位点巾,构建重组质粒pcDNA3.1-HO-1,采用限制性酶切、DNA测序鉴定,将构建好的质粒瞬时转染ECV304细胞株,Westernblot测定HO-1表达。结果:酶切、测序鉴
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