观察沉默Herg1的表达对骨肉瘤增殖和侵袭的影响，并探讨其可能的调控机制。
方法构建重组腺病毒载体Ad5－Herg1－shRNA并检测其转染效能。分别采用细胞计数试剂盒8(CCK－8)法、划痕实验、Transwell实验、肿瘤生长曲线和活体成像检测Ad5－Herg1－shRNA转染后人骨肉瘤细胞株143B、U2OS的增殖、迁移和侵袭能力变化，采用串联亲和纯化/质谱法寻找可能与Herg1相互作用的蛋白并进行鉴定，采用Western blot法检测转染前后骨肉瘤细胞中大肿瘤抑制因子1(LATS1)、Yes激酶相关蛋白(YAP)及其磷酸化后的表达变化。
结果Ad5－Herg1－shRNA转染能有效抑制骨肉瘤细胞中Herg1的表达。CCK－8法检测结果显示，Ad5－Herg1－shRNA1组和Ad5－Herg1－shRNA2组143B细胞的存活率分别为(65.47±3.90)%和(79.90±1.52)%，U2OS细胞的存活率分别为(69.69±1.36)%和(76.72±2.75)%，均明显低于Ad5－control－shRNA组(均P<0.001)。划痕实验显示，Ad5－Herg1－shRNA1组和Ad5－Herg1－shRNA2组143B细胞的迁移率分别为(33.03±2.88)%和(36.47±4.16)%，U2OS细胞的迁移率分别为(68.07±0.90)%和(73.97±1.25)%，均明显低于Ad5－control－shRNA组(均P<0.001)。Transwell侵袭实验显示，Ad5－Herg1－shRNA1组和Ad5－Herg1－shRNA2组143B细胞的侵袭细胞数分别为(36.50±12.15)个和(44.83±7.62)个，U2OS细胞的侵袭细胞数分别为(21.83±7.99)个和(22.85±7.08)个，均明显低于Ad5－control－shRNA组(均P<0.001)。体内实验结果显示，从第14天起，Ad5－Herg1－shRNA1组裸鼠骨肉瘤体积小于Ad5－control－shRNA组(P<0.001)。接种5周后，Ad5－Herg1－shRNA1组瘤重为(0.36±0.10)g，低于Ad5－control－shRNA组(P<0.001)。裸鼠活体成像显示，Ad5－control－shRNA组明显可见其他部位肿瘤转移且荧光信号值高，而Ad5－Herg1－shRNA1未见其他部位的肿瘤转移。Herg1蛋白与2型神经纤维瘤(NF2)蛋白相互作用，沉默Herg1可明显下调骨肉瘤中LATS1和YAP蛋白的表达，并促进LATS1和YAP的磷酸化。
结论Herg1可能通过调控Hippo信号通路参与骨肉瘤的增殖和侵袭过程，其有望成为骨肉瘤治疗的潜在靶点。