【摘 要】
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目的克隆并表达黄杆菌肝素酶Ⅰ（HepⅠ）基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepⅠ基因，验证后插入到表达质粒pET-22b中构建表达载体，重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）进行
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,山东大学药学院
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目的克隆并表达黄杆菌肝素酶Ⅰ（HepⅠ）基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepⅠ基因，验证后插入到表达质粒pET-22b中构建表达载体，重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）进行蛋白质表达，并用AzureA法测定酶活性。结果PCR扩增得到序列正确的HepI基因，并将该基因成功插入到pET-22b表达载体中。重组质粒转入E．coliBL21（DE3）后表达的蛋白质经SDS—PAGE分析，与目的蛋白质的相对分子质量基本一致，其活性约为50U／LA600。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepⅠ基
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