【摘 要】
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普鲁兰酶(pullulanase)是一种淀粉脱支酶,在淀粉糖化加工等工业生产中具有重要的应用价值.选用地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BL10作为表达宿主,为了提高其中的普鲁兰
【机 构】
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河北农业大学生命科学学院,河北保定071000;中国农业科学院生物技术研究所,北京100081;中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081;河北农业大学生命科学学院,河北保定,071000
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普鲁兰酶(pullulanase)是一种淀粉脱支酶,在淀粉糖化加工等工业生产中具有重要的应用价值.选用地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BL10作为表达宿主,为了提高其中的普鲁兰酶产量,对来自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168和地衣芽孢杆菌BL10中的15种不同信号肽以及4种不同启动子进行筛选,构建了不同的重组工程菌株,最终发现在以P43为启动子、apr为信号肽的条件下,上清液中普鲁兰酶的表达量最高,酶活可达12 U/mL,且测得其最适反应温度为60℃,最适pH为4.5.结果 表明通过对启动子及信号肽进行筛选是提高重组工程菌株中目的蛋白表达量的一种有效手段.
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