【摘 要】
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双链DNA (dsDNA)定量分析是植物分子生物学研究的基础, 对基因型分析尤为重要.本研究以λ 噬菌体dsDNA 为标准样品, 建立了荧光定量标准曲线, 探讨荧光核酸定量通量性及其与紫
【机 构】
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中国农业科学院作物科学研究所、国家小麦改良中心,InternationalMaizeandWheatImprovementCenter(CIMMYT),河南省农业科学院小麦研究所,CIMMYT中国办事
【基金项目】
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本研究由国家重点研发计划项目(2016YFD0101804-6),国家自然科学基金项目(31671691),国家科技支撑计划项目(2014BAD01B05)和科技部国际合作项目(2013DFG30530)资助.
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双链DNA (dsDNA)定量分析是植物分子生物学研究的基础, 对基因型分析尤为重要.本研究以λ 噬菌体dsDNA 为标准样品, 建立了荧光定量标准曲线, 探讨荧光核酸定量通量性及其与紫外法定量的差异, 并分析荧光染料在基因分型中的应用.结果表明, 荧光染料能够对dsDNA 进行高效微量定量分析(〈1.1 ng ·L^-1), 但因鉴定核酸的浓度较低, 对小麦籽粒和叶片全基因组DNA 定量时稀释倍数较大, 易增大浓度误差.降低反应体系量导致标准曲线决定系数降低, 影响测量准确性.精确定量dsDN
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