定量检测人超敏C-反应蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立及初步临床应用

来源 :中国临床药理学与治疗学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:losches
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目的:建立定量检测人超敏C-反应蛋白(CRP)双抗体夹心EUSA方法。方法:采用Protein A亲和层析法纯化本室制备的抗CRP单克隆抗体(mAbs),并行SDS—PAGE和Western blotting对纯化抗体特性进行鉴定;利用简易过碘酸钠法对抗CRPmAbs进行标记HRP后行抗体配对实验;通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度;以纯化的CRP抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法。初步对人血浆中的超敏CRP水平进行检测。结果:最佳配对组合为抗CRP
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