【摘 要】
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目的建立并评估同步分离卵巢内不同发育阶段卵泡的方法——酶消化后滤网过滤法。方法运用混合有胶原酶Ⅰ和脱氧核糖核酸酶Ⅰ的消化酶来消化小鼠卵巢预切组织，然后依次通过不同孔径（100 μm、40 μm、20 μm）的滤网以实现不同发育阶段卵泡同步分离的目的，将翻转冲洗100 μm滤网得到的卵泡记为A组（>100 μm），翻转冲洗40 μm滤网得到的卵泡记为B组（40~100 μm），翻转冲洗20 μm滤网
【机 构】
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蚌埠医学院临床医学院 233030;浙江省人民医院，杭州医学院附属人民医院 310014,浙江省人民医院，杭州医学院附属人民医院 310014,浙江省人民医院，杭州医学院附属人民医院 310014,浙
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目的建立并评估同步分离卵巢内不同发育阶段卵泡的方法——酶消化后滤网过滤法。
方法运用混合有胶原酶Ⅰ和脱氧核糖核酸酶Ⅰ的消化酶来消化小鼠卵巢预切组织，然后依次通过不同孔径（100 μm、40 μm、20 μm）的滤网以实现不同发育阶段卵泡同步分离的目的，将翻转冲洗100 μm滤网得到的卵泡记为A组（>100 μm），翻转冲洗40 μm滤网得到的卵泡记为B组（40~100 μm），翻转冲洗20 μm滤网得到的卵泡记为C组（20~40 μm）。评估并比较经不同孔径滤网筛选获得的卵泡群的数量、大小、形态、活力和发育潜能。
结果数量上，C组获得的卵泡数目最多，A组次之，B组最少；形态上，C组卵泡基底膜完整率高于A组和B组（P<0.001，P<0.001）。活力上，A组卵泡的存活率70.59%（120/170）高于B组51.79%（58/112）和C组35.90%（28/78）（P=0.001 6，P<0.001）。发育潜能上，经过96 h体外培养，A组卵泡直径由（113.64±9.57） μm增长至（150.95±45.90） μm（P=0.002 4），B组卵泡直径由（88.12±9.12） μm增长至（120.61±18.00） μm （P<0.001），C 组卵泡在培养第24 h内出现单层颗粒细胞贴壁，卵母细胞与颗粒细胞之间失去连接结构，卵母细胞完全裸露，未能培养成功。
结论酶消化后多重滤网过滤法能快速有效获得大量形态完整、有活力和发育潜能良好的卵泡，且能达到不同发育阶段卵泡同步分离的目的。
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