【摘 要】
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目的 探讨二乙基二硫代氨基甲酸（DDC）对肝星状细胞（HSCs）中脂滴蛋白Perilipin 5（Plin5）表达的调控作用及对HSCs活化的影响。方法 将雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为3组:对照组给予正常饮食喂养;模型组给予胆碱缺乏、L-氨基酸替代蛋白饲料（CDAA）喂养，建立非酒精性脂肪性肝炎（NASH）纤维化模型;治疗组给予DDC灌胃治疗。GFAP和Plin5免疫荧光双染观察小鼠肝
【机 构】
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首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心肝硬化转化医学北京市重点实验室暨国家消化系统疾病临床医学研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金（编号:82070618,81770596）；
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目的 探讨二乙基二硫代氨基甲酸（DDC）对肝星状细胞（HSCs）中脂滴蛋白Perilipin 5（Plin5）表达的调控作用及对HSCs活化的影响。方法 将雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为3组:对照组给予正常饮食喂养;模型组给予胆碱缺乏、L-氨基酸替代蛋白饲料（CDAA）喂养，建立非酒精性脂肪性肝炎（NASH）纤维化模型;治疗组给予DDC灌胃治疗。GFAP和Plin5免疫荧光双染观察小鼠肝组织HSCs中Plin5表达，明确DDC对HSCs中Plin5表达的调控作用。应用DDC处理人肝星状细胞系LX-2,Real-time PCR方法检测Plin5表达，脂滴染色观察脂滴变化，明确DDC对LX-2细胞Plin5表达及脂滴形成的影响; Real-time PCR方法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及Ⅲ型胶原等的表达，明确DDC对LX-2细胞活化的影响。结果 在CDAA饮食诱导的NASH肝纤维化小鼠肝组织中，Plin5在HSCs中的表达较对照组显著降低;与模型组相比，DDC治疗组小鼠肝组织中Plin5在HSCs中表达显著升高。与对照组相比，DDC组处理12 h及24 h时，Plin5的mRNA相对表达量均显著增高（1.00±0.15 vs. 1.93±0.70; 1.00±0.33 vs.1.86±0.09），差异有统计学意义（P ＜0.05）。同时，LX-2脂滴染色结果显示，与对照相比，DDC组处理后LX-2细胞中脂滴数量显著增多[（0.71±0.12）%vs.（1.32±0.15）%]，差异有统计学意义（P ＜0.05），且脂滴多位于细胞核周围，提示DDC可促进LX-2细胞恢复静止状态。与对照组相比，DDC组处理12 h及24 h时可显著抑制LX-2细胞中α-SMA、Ⅲ型胶原表达（1.00±0.07 vs. 0.36±0.21; 1.00±0.12 vs. 0.66±0.02; 1.00±0.04 vs. 0.63±0.26; 1.00±0.15 vs. 0.76±0.07），差异均有统计学意义（P ＜0.05），提示DDC可抑制LX-2活化。结论 DDC可以上调HSCs中Plin5表达，促进脂滴形成并抑制HSCs活化。
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