【摘 要】
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本研究旨在探究HIF-2α和Notch3在CoCl2诱导的乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭中的作用。使用CoCl2于体外建立化学性低氧模型;采用sh RNA技术沉默MCF-7细胞中HIF-2α和Notch3基因;
【机 构】
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漯河医学高等专科学校分子医学实验室,
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本研究旨在探究HIF-2α和Notch3在CoCl2诱导的乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭中的作用。使用CoCl2于体外建立化学性低氧模型;采用sh RNA技术沉默MCF-7细胞中HIF-2α和Notch3基因;采用RT-PCR法检测MCF-7细胞中HIF-2α、Notch3和Hey1的m RNA水平;采用Western blot方法检测MCF-7细胞中HIF-2α、Notch3、Hey1、Snail和E-cadherin蛋白的表达水平;采用划痕实验和Transwell实验分别检测CoCl2诱导的MCF-7细胞迁移和侵袭。结果显示,CoCl2处理可使MCF细胞中HIF-2α、Notch3、Hey1和Snail蛋白表达水平升高（P<0.05）,E-cadherin蛋白表达水平下降（P<0.05）,促进MCF-7细胞迁移和侵袭（P<0.05）;沉默HIF-2α基因表达可抑制CoCl2诱导的Notch3和Hey1的m RNA和蛋白表达（P<0.05）;抑制Notch3基因表达后,CoCl2诱导的MCF-7细胞迁移和侵袭以及CoCl2对Snail和E-cadherin蛋白表达的调节随之受到抑制（P<0.05）。以上结果表明,在CoCl2化学性低氧环境下,HIF-2α可通过强化Notch3信号通路,进而导致Snail蛋白水平升高和E-cadherin蛋白水平下降,最终提高乳腺癌MCF-7细胞的迁移和侵袭能力。
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