【摘 要】
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目的 研究脉冲电场对AC16人心室肌细胞的影响.方法 利用人心室肌AC16细胞系,使用ECM830电穿孔仪,设置脉宽1 ms、频率2 Hz/5 Hz、电场强度100～2000 V/cm梯度脉冲电场对细胞进行电穿孔.再通过台盼蓝染色、CCK-8观察细胞活力,得到不同参数脉冲电场对AC16细胞活力的影响.并通过AnnexinV&PI法染色利用流式细胞术观察刺激后凋亡/坏死情况.结果 在脉宽1 ms、2 Hz的基础脉冲参数作用后,观察到AC16细胞暴露在高场强的脉冲电场中细胞肿胀、破裂,发生不可逆性死亡.电压阈
【机 构】
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上海交通大学医学院附属新华医院心内科,上海200092;上海理工大学机械工程学院
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目的 研究脉冲电场对AC16人心室肌细胞的影响.方法 利用人心室肌AC16细胞系,使用ECM830电穿孔仪,设置脉宽1 ms、频率2 Hz/5 Hz、电场强度100～2000 V/cm梯度脉冲电场对细胞进行电穿孔.再通过台盼蓝染色、CCK-8观察细胞活力,得到不同参数脉冲电场对AC16细胞活力的影响.并通过AnnexinV&PI法染色利用流式细胞术观察刺激后凋亡/坏死情况.结果 在脉宽1 ms、2 Hz的基础脉冲参数作用后,观察到AC16细胞暴露在高场强的脉冲电场中细胞肿胀、破裂,发生不可逆性死亡.电压阈值大于1000 V/cm时细胞死亡率明显增加(对照组:2％,1000 V/cm组:36.8％),细胞活力明显降低(对照组的29.9％ ～46.4％).且一定程度内增加脉冲次数与增加频率不改变引起死亡的电压阈值.Annexin V-FITC与PI共染色通过流式细胞术发现1000及以上的电场强度显著增加了AnnexinV的荧光强度,证实1 ms的脉冲电场通过凋亡途径导致细胞死亡.结论 AC16细胞对脉冲电场诱导的凋亡具有稳定而明确的阈值,细胞死亡与脉冲次数和频率无关.
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