猪脑突触体质膜(Ca^2+—Mg^2+)—ATPase的分离纯化与性质

来源 :生物化学与生物物理进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rachieyu
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以猪脑为材料,经匀浆、差速离心、蔗糖密度梯度离心分离突触体.低渗破膜得到突触体膜.Triton X100增溶后,经钙调蛋白亲和层析可得去脂的质膜Ca2+-ATPase.用大体积亲和柱和大体积低Ca2+淋洗液淋洗,可得产率、纯度和活性均较高的质膜Ca2+-ATPase.与大豆磷脂保温后,去脂的Ca2+-ATPase的水解活力可恢复达3.32 μmol/(mg·min).SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳银染显示单一蛋白质带,分子质量约为140 ku,纯度在90%以上.不同Ca2+浓度明显影响酶的活力.
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