鸡Ii基因的克隆、鉴定及其原核表达

来源 :安徽农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:leezuo
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从ConA诱导的5周龄SPF鸡脾细胞中提取总RNA,用自行设计的一对引物通过RT-PCR方法扩增出鸡恒定链(invariant chain,Ii)基因片段.经酶切鉴定后,再将该片段克隆到pcDNA3载体中,测定其DNA序列,结果表明该片段长度为669 bp,其DNA序列与GenBank登录的基本一致.再将该片段插入原核表达载体PGEX-4T-1,并导入菌株BL21, 经诱导培养、蛋白提取和SDS-PAGE,获得分子量约为50 kD的特定蛋白条带,表明所克隆的鸡Ii基因在原核细胞中得到表达.
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