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目的
探讨胃癌细胞SGC7901在体外血管生成拟态(VM)的形成过程中,自噬特异性基因Beclin-1的表达情况及其对VM形成的影响。
方法分别将ShRNA整合质粒载体和空白质粒载体转染到胃癌细胞SGC7901中,采用RT-PCR及Western blot法检测SGC7901细胞中Beclin-1表达情况;并在体外构建VM模型,观察不同转染细胞中VM形成能力的差异,同时检测VM形成前后细胞中VM形成基因Notch-1的表达情况。
结果胃癌SGC7901形成VM过程中,Beclin-1及Notch-1 mRNA和蛋白表达均明显升高(均P<0.05)。与转染空白质粒的SGC7901细胞相比,转染ShRNA整合质粒抑制Beclin-1后,VM形成的细胞管状结构的数目[(15.4±1.1)个比(37.8±1.9)个,P<0.05]、长度[(316.8±24.6)mm比(385.1±14.2)mm,P<0.05]和交点数[(11.6±1.1)个比(27.2±1.1)个,P<0.05]明显减少,同时Notch-1表达亦明显下降(P<0.05)。
结论Beclin-1通过维持胃癌细胞VM调节基因的稳定表达促使VM形成,抑制Beclin-1为胃癌的基因治疗提供了一个可能的新靶点。