【摘 要】
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目的 研究3种不同的肌源性诱导方法对脐血间质干细胞(mesenchymal stem ceils,MSCs)进行诱导后细胞内Ca2+调控系统分化的影响.方法 2007年1月至2010年4月上海交通大学医学院
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目的 研究3种不同的肌源性诱导方法对脐血间质干细胞(mesenchymal stem ceils,MSCs)进行诱导后细胞内Ca2+调控系统分化的影响.方法 2007年1月至2010年4月上海交通大学医学院附属新华医院采用5-氮杂胞嘧啶核苷(5-azacytidine,5-aza)、心肌裂解液和心肌诱导液分别诱导犬脐血MSCs.采用激光共聚焦显微镜检测5-aza、心肌裂解液和心肌诱导液诱导的细胞、心肌细胞和MSCs内Ca2+荧光探针Fluo-3/AM结合的Ca2+,每份细胞选取2～5个视野,每一种细胞观察记录30个视野,取每1 min摄得的10张图象的平均荧光强度值,以光密度值(OD)反映细胞内游离Ca2+浓度;并连续监测细胞内游离Ca2+浓度的变化.结果 经3种方法诱导后细胞内游离Ca2+浓度均高于心肌细胞内游离Ca2+浓度(F=59.400,P=0.000).5-aza、心肌裂解液和心肌诱导液诱导的细胞内游离Ca2+浓度差异有统计学意义(F=18.988,P=0.000).5-aza诱导的细胞内游离Ca2+浓度与心肌裂解液诱导的细胞比较差异无统计学意义(OD 1 076.88±44.65 vs.1 040.90±37.48,P=0.186),但其浓度高于心肌诱导液诱导的细胞(OD 1 076.88±44.65 vs.973.91±46.49,P=0.001),心肌裂解液诱导的细胞内游离Ca2+浓度高于心肌诱导液诱导的细胞(OD 1 040.90±37.48 vs.973.91±46.49,P=0.001).3种诱导方法诱导后的细胞内游离Ca2+呈自发性波动,与心肌细胞相似,但其频率和幅度有明显差异.5-aza、心肌裂解液诱导后的MSCs在KCI刺激下能使细胞内Ca2+瞬时释放,心肌诱导液诱导后的MSCs对KCI也有反应,但不能诱发Ca2+释放,而是使Ca2+释放时间延长.结论 5-aza诱导、心肌裂解液和心肌诱导液诱导对MSCS的Ca2+调控系统有分化作用,3种方法的效果不同,其产生差异的原因和效果的优劣需进一步实验阐明.
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