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为了通过基因工程手段来增加苯丙氨酸的生物产量,利用PCR方法从大肠杆菌中克隆了抗反馈抑制突变型及野生型的pheA基因,进行了核苷酸序列分析,并利用高效的原核表达载体PBV220对pheA基因编码的突变型及野生型分支酸变位酶/预苯酸脱水酶(CM/PD)进行了表达。序列分析表明突变型基因碱基第580位由T变为C,相应氨基酸由Val变为Ala,SDS-PAGE图谱扫描分析表明目的蛋白CM/PD的表达量占全菌体蛋白的43%,占上清总蛋白的57%。酶活性测定表明其CM和 PD活性分别提高了 15.5和6.7倍,产酸