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摘要：目的 对液质联用检测消肿止痛中成药的氨基比林及双氯芬酸钠进行研究。方法 采取C18柱分离，以乙腈-水作为流动相梯度洗脱，流速为0.5ml·min-1，所采取的检测波长为280nm，所采取离子源为ESI源，正负离子交替方式实施定性检测，HPLC测量含量。结果 在四批受试制剂当中有两批受试剂当中检测到存在违法添加双氯芬酸钠，一批检测到违规添加氨基比林。结论 液质联用检测方式具有较强选择性以及高灵敏度，能够成为消肿止痛中成药的氨基比林及双氯芬酸钠的检测方式之一。
关键词：液质联用检测;消肿止痛中成药;氨基比林;双氯芬酸钠
【中图分类号】R285.6 【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2020）10-106-01
众所周知，风湿性关节炎在中医当中被称为痹症，中医药物作为国粹，在治疗痹症中有着较大的优势，治疗以及调理效果兼备，然而大多数的中药虽然不良反应出现率较低，但是效果起效时间慢[1]。很多不法商家利用人们信赖中药效果但急于求成的心态，在中药制剂当中非法添加一些化学药物，进而达到提升药物效果的作用。患者如果长期服用这类药物极有可能会发生极为严重的不良反应。在检定中药制剂时，如果单纯采取液相色谱测定将存在分离困难情况，大大增加假阳性情况[2]。因此，选择更加灵敏以及快速的检测方式极为重要。本文正是基于此，对液质联用检测消肿止痛中成药的氨基比林及双氯芬酸钠进行研究，具体研究情况如下。
1仪器与试药
1.1仪器
本研究所使用的仪器为Agilentl200-6310离子脱液质联用仪，配备有1200系统、电喷雾源、紫外检测器，Agilent色谱化学工作站，电子天平。所有的仪器均经过校正以及检定。
1.2试药
研究随机采取的试药为双氯芬酸钠对照品以及氨基比林对照品，色谱纯为乙睛，水则为重蒸馏水，所使用的其他試剂为分析纯。
2线性关系考察
2.1 HPLC法
分别选择1、5、10、25以及50毫升的双氯芬酸钠以及氨基比林对照品储备液放置在同一个100毫升量瓶当中，增加流动相稀释到相关刻度的刻度浓度溶液，将其摇匀，依据色谱条件依次使用10ul，对峰面积进行测定，分别采取双氯芬酸对照品和氨基比林对照品进样浓度作为横坐标，峰面积作为纵坐标进行回归，结果发现，双氯芬酸钠以氨基比林进样浓度为5至250ug·ml-1以及1至50ug·ml-1范围内线性良好。
2.2MS法
采取多反应监测模式，采取上述HPLC法当中的含氨基比林以及双氯芬酸钠浓度溶液对离子氨基比林进行检测，结果发现，双氯芬酸钠以及氨基比林质谱响应情况较好。
2.3精密度试验
选取25ug·ml-1氯基比林以及5ug·ml-1的双氯芬酸钠对照品混合溶液依据色谱条件进行六次重复进样后发现，氨基比林以及双氯芬酸钠峰面积分别为0.46%和0.39%。
2.4重复性实验
选取样品溶液依据色谱条件进行六次重复测定，结果发现氨基比林平均含量为每粒63.57mg，双氯芬酸钠为每粒25.63mg。
2.5耐用性试验
选择供试品溶液依据色谱条件，选择三根不同品牌的十八烷基硅烷健合硅胶作为填充剂的色谱柱实施实验，结果发现该方式具备良好的耐用性。
2.6最低检出限定以及定量限
选择对照品溶液对其进行不同比例稀释之后测定发现，双氯芬酸钠以及氨基比林最低检测限分别是0.3ng以及0.1ng，定量限分别是1.0ng以及0.3ng。
2.7稳定性试验
选择样品溶液在室温当中进行0、2、4、6、8以及12小时之后依据色谱条件进行测定后发现，双氯芬酸钠以及氨基比林面积值为0.61%以及0.58%，说明该样品溶液在12之内较为稳定。
2.8加样回收实验
样品加样溶液制备选择已知含量样品九份分别加入高、中以及低三个浓度氨基比林以及双氯芬酸钠对照品混合溶液，将其均分为三份，对其含量进行测定，计算起加样回收率后发现，氨基比林平均回收率为99.33%，RSD为0.4%，双氯芬酸钠平均回收率为99.50%，RSD为0.52%，说明该检测方式具备良好准确性。
2.9HPLC-UV样品测定
分别选择四批消肿止痛中药制剂进行样品溶液制备，精密吸取10ul的经过0.22um微孔滤膜过滤之后的样品溶液以及对照品溶液，依据色谱条件发现样品一当中的色谱图中存在和双氯芬酸钠以及氨基比林一致的色谱峰，样品二色谱图当中发现和双氯芬酸钠有着保留时间一致的色谱峰，剩余的样品当中并没有检出和双氯芬酸钠以及氨基比林保留时间一致的色谱峰。采取外标法对样品含量进行计算后结果如下表1。
结论
在本文研究当中，采取液相色谱-离子阱质谱联用法能够使用质荷比筛选方式得出复杂基质当中的单一组分色谱图，不需要进行和干扰组分间完全色谱分离，该方式操作简单，具备较强的抗干扰能力，可以有效避免出现假阳性结果情况[3]。此外，这一方式所耗费的分析时间较短，样品处理方式简单，还具备能够定性以及定量添加物等等优势[4]。
参考文献
[1]张甦，胡青，孙健等.液质联用检测中成药和保健食品中非法添加的48种抗生素类成分[J].中成药，2015，37（3）：542-548.
[2]杨丽蓉，赵红磊，赵海鹏等.HPLC-DAD/MS法测定抗风湿中成药中非法添加10种抗风湿化学成分[J].中国药品标准，2018，19（3）：235-240.
[3]冯向东，张玉洁，王戈等.HLB固相萃取-HPLC-MS/MS法测定乌鸡白凤（小蜜丸）中氯霉素残留[J].中国药事，2016，30（10）：1009-1014.
[4]陈立群，曹云飞.UPLC-MS法测定降压类中成药和保健食品中非法添加硝苯地平的含量[J].黑龙江医药，2016，29（1）：3-5，6.
关键词：液质联用检测;消肿止痛中成药;氨基比林;双氯芬酸钠
【中图分类号】R285.6 【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2020）10-106-01
众所周知，风湿性关节炎在中医当中被称为痹症，中医药物作为国粹，在治疗痹症中有着较大的优势，治疗以及调理效果兼备，然而大多数的中药虽然不良反应出现率较低，但是效果起效时间慢[1]。很多不法商家利用人们信赖中药效果但急于求成的心态，在中药制剂当中非法添加一些化学药物，进而达到提升药物效果的作用。患者如果长期服用这类药物极有可能会发生极为严重的不良反应。在检定中药制剂时，如果单纯采取液相色谱测定将存在分离困难情况，大大增加假阳性情况[2]。因此，选择更加灵敏以及快速的检测方式极为重要。本文正是基于此，对液质联用检测消肿止痛中成药的氨基比林及双氯芬酸钠进行研究，具体研究情况如下。
1仪器与试药
1.1仪器
本研究所使用的仪器为Agilentl200-6310离子脱液质联用仪，配备有1200系统、电喷雾源、紫外检测器，Agilent色谱化学工作站，电子天平。所有的仪器均经过校正以及检定。
1.2试药
研究随机采取的试药为双氯芬酸钠对照品以及氨基比林对照品，色谱纯为乙睛，水则为重蒸馏水，所使用的其他試剂为分析纯。
2线性关系考察
2.1 HPLC法
分别选择1、5、10、25以及50毫升的双氯芬酸钠以及氨基比林对照品储备液放置在同一个100毫升量瓶当中，增加流动相稀释到相关刻度的刻度浓度溶液，将其摇匀，依据色谱条件依次使用10ul，对峰面积进行测定，分别采取双氯芬酸对照品和氨基比林对照品进样浓度作为横坐标，峰面积作为纵坐标进行回归，结果发现，双氯芬酸钠以氨基比林进样浓度为5至250ug·ml-1以及1至50ug·ml-1范围内线性良好。
2.2MS法
采取多反应监测模式，采取上述HPLC法当中的含氨基比林以及双氯芬酸钠浓度溶液对离子氨基比林进行检测，结果发现，双氯芬酸钠以及氨基比林质谱响应情况较好。
2.3精密度试验
选取25ug·ml-1氯基比林以及5ug·ml-1的双氯芬酸钠对照品混合溶液依据色谱条件进行六次重复进样后发现，氨基比林以及双氯芬酸钠峰面积分别为0.46%和0.39%。
2.4重复性实验
选取样品溶液依据色谱条件进行六次重复测定，结果发现氨基比林平均含量为每粒63.57mg，双氯芬酸钠为每粒25.63mg。
2.5耐用性试验
选择供试品溶液依据色谱条件，选择三根不同品牌的十八烷基硅烷健合硅胶作为填充剂的色谱柱实施实验，结果发现该方式具备良好的耐用性。
2.6最低检出限定以及定量限
选择对照品溶液对其进行不同比例稀释之后测定发现，双氯芬酸钠以及氨基比林最低检测限分别是0.3ng以及0.1ng，定量限分别是1.0ng以及0.3ng。
2.7稳定性试验
选择样品溶液在室温当中进行0、2、4、6、8以及12小时之后依据色谱条件进行测定后发现，双氯芬酸钠以及氨基比林面积值为0.61%以及0.58%，说明该样品溶液在12之内较为稳定。
2.8加样回收实验
样品加样溶液制备选择已知含量样品九份分别加入高、中以及低三个浓度氨基比林以及双氯芬酸钠对照品混合溶液，将其均分为三份，对其含量进行测定，计算起加样回收率后发现，氨基比林平均回收率为99.33%，RSD为0.4%，双氯芬酸钠平均回收率为99.50%，RSD为0.52%，说明该检测方式具备良好准确性。
2.9HPLC-UV样品测定
分别选择四批消肿止痛中药制剂进行样品溶液制备，精密吸取10ul的经过0.22um微孔滤膜过滤之后的样品溶液以及对照品溶液，依据色谱条件发现样品一当中的色谱图中存在和双氯芬酸钠以及氨基比林一致的色谱峰，样品二色谱图当中发现和双氯芬酸钠有着保留时间一致的色谱峰，剩余的样品当中并没有检出和双氯芬酸钠以及氨基比林保留时间一致的色谱峰。采取外标法对样品含量进行计算后结果如下表1。
结论
在本文研究当中，采取液相色谱-离子阱质谱联用法能够使用质荷比筛选方式得出复杂基质当中的单一组分色谱图，不需要进行和干扰组分间完全色谱分离，该方式操作简单，具备较强的抗干扰能力，可以有效避免出现假阳性结果情况[3]。此外，这一方式所耗费的分析时间较短，样品处理方式简单，还具备能够定性以及定量添加物等等优势[4]。
参考文献
[1]张甦，胡青，孙健等.液质联用检测中成药和保健食品中非法添加的48种抗生素类成分[J].中成药，2015，37（3）：542-548.
[2]杨丽蓉，赵红磊，赵海鹏等.HPLC-DAD/MS法测定抗风湿中成药中非法添加10种抗风湿化学成分[J].中国药品标准，2018，19（3）：235-240.
[3]冯向东，张玉洁，王戈等.HLB固相萃取-HPLC-MS/MS法测定乌鸡白凤（小蜜丸）中氯霉素残留[J].中国药事，2016，30（10）：1009-1014.
[4]陈立群，曹云飞.UPLC-MS法测定降压类中成药和保健食品中非法添加硝苯地平的含量[J].黑龙江医药，2016，29（1）：3-5，6.