【摘 要】
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目的:探讨螺内酯对实验性肝纤维化的影响及其作用机制.方法:雄性Wistar大鼠24只,随机分为3组,每组8只.模型组:CCl4油2.5mL/kgSC,3次/wk;螺内酯组:CCl4油注射的同时每日予以螺
【机 构】
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南方医科大学南方医院急诊科,南方医科大学南方医院呼吸科,南方医科大学南方医院消化科
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目的:探讨螺内酯对实验性肝纤维化的影响及其作用机制.方法:雄性Wistar大鼠24只,随机分为3组,每组8只.模型组:CCl4油2.5mL/kgSC,3次/wk;螺内酯组:CCl4油注射的同时每日予以螺内酯20mg/kg灌胃,1次/d;对照组:橄榄油SC.于4wk取材,VG染色检测大鼠肝组织学改变.Western印迹法检测肝组织TGF-β1的表达.EMSA检测肝组织NF-κB的活性.酶图法测定MMP-2,9的活性.另培养大鼠HSC-T6,分别予醛固酮(Aldo)1μmol/L、螺内酯1μmol/L(预处理60min,再予Aldo刺激1h)和TNFα100μg/L处理1h,设立阴性对照组.EMSA检测NF-κB DNA结合活性;Western印迹检测胞质内IκBα的表达.结果:体内4wk,螺内酯组纤维化分级小于模型组(螺内酯组vs模型组,P<0.01);模型组TGF-β1的表达明显高于螺内酯治疗组(模型组vs螺内酯治疗组,P<0.05).模型组NF-κB结合活性显著增强(模型组vs对照组,P<0.01),螺内酯可抑制肝组织NF-κB结合活性(螺内酯组vs模型组,P<0.05).模型组MMP2,9活性显著增强(模型组vs对照组,P<0.01),螺内酯可抑制MMP2,9活性(螺内酯组vs模型组,P<0.05).体外Aldo和TNFα干预1h后,NF-κB DNA结合活性增强(Aldo处理组vs对照组,P<0.01),螺内酯可抑制NF-κB DNA结合活性(螺内酯+Al-do处理组vsAldo处理组,P<0.05).Aldo可减低胞浆内IκBα表达(Aldo处理组vs对照组,P<0.05).螺内酯则抑制胞质蛋白中IκBα表达的减低(螺内酯+Aldo处理组vs Aldo处理组,P<0.05).结论:螺内酯可抑制实验性肝纤维化形成,其抗肝纤维化作用与抑制肝组织TGF-β1的表达以及NF-κB和MMP2,9的活性有关.
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