【摘 要】
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目的探讨艾滋病病毒1型(HIV-1)感染恒河猴外周血单个核细胞(PMBCs),并在其中传代的可能性.方法用HIV-1感染原代猴PBMCs,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定培养0、2、3、7
【机 构】
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中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心,北京,100050;中国医学科学院生物医学研究所,昆明,650107;
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目的探讨艾滋病病毒1型(HIV-1)感染恒河猴外周血单个核细胞(PMBCs),并在其中传代的可能性.方法用HIV-1感染原代猴PBMCs,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定培养0、2、3、7天时上清液中的HIV-1 P24抗原,以观察HIV-1在猴细胞中的复制情况,比较HIV-1分别在人和猴细胞感染的复制动力学.同时采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增HIV-1的env基因,并对其C2-V3区进行序列分析.结果HIV-1毒株SF33、89.6、ⅢB感染猴PBMCs后的第3天,P24抗原达到最高,随着培养时间的延长,P24抗原逐渐降低.将SF33、ⅢB、89.6、YN19四个毒株分别感染猴PBMCs并盲传3代后,P24抗原测定结果均为阴性.提取盲传各代细胞脱氧核糖核酸(DNA)进行PCR扩增,结果显示,SF33、ⅢB、YN19、89.6感染猴细胞的第一代和89.6感染猴细胞的第二代,均可以检测到HIV 1前病毒核酸.比较原毒株env基因C2-V3区的序列发现,传代后的基因序列SF33有5个碱基改变外,其它HIV-1只有0～2个核苷酸改变.与SF33感染猴PBMCs的表现相反,其感染人PBMCs时,HIV-1的复制一直维持在较高的水平.结论应用3个实验株、1个临床分离株HIV-1,虽都能够感染恒河猴外周淋巴细胞,但均难以继代,提示能否用恒河猴作为HIV 1研究的动物模型,尚待进一步的体内外研究.
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