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为了获得重组的凝乳酶,本研究首先提取了小牛皱胃总RNA,通过RT—PCR的方法得到了凝乳酶的cDNA。然后,构建了原核表达载体pTWIN1/chy,并将该质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达重组凝乳酶蛋白。SDS—PAGE电泳分析和酶活性实验结果显示,目的蛋白在BL21(DE3)中获得高效表达,并具有凝乳活性。