【摘 要】
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目的构建人MCPIP基因的真核表达载体,观察其在人胚肾细胞系(HEK293T)细胞中的表达及其定位特征。方法佛波酯(PMA)刺激单核细胞THP-1转化为巨噬细胞,提取细胞mRNA,反转录为cDNA作
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目的构建人MCPIP基因的真核表达载体,观察其在人胚肾细胞系(HEK293T)细胞中的表达及其定位特征。方法佛波酯(PMA)刺激单核细胞THP-1转化为巨噬细胞,提取细胞mRNA,反转录为cDNA作为模板,扩增MCPIP基因编码区序列,克隆入真核细胞载体中,酶切鉴定目的基因。将重组质粒转染HEK293T细胞,Westernblot检测MCPIP蛋白质表达状况,激光共聚焦显微镜下直接观察基因定位情况。结果酶切鉴定和测序证明,成功构建MCPIP真核表达载体。Westernblot检测表明MCPIP真核表达载体
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