【摘 要】
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目的构建针对人黑色素浓集激素受体2（MCHR2）的shRNA真核表达载体,并在人胚肾293（HEK293）细胞中观察其对MCHR2基因表达的影响。方法根据MCHR2基因序列,设计并合成特异性的小干扰片
【机 构】
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重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,教育部临床检验诊断学重点实验室,湖北民族学院医学院生物化学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助课题（30671008）
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目的构建针对人黑色素浓集激素受体2（MCHR2）的shRNA真核表达载体,并在人胚肾293（HEK293）细胞中观察其对MCHR2基因表达的影响。方法根据MCHR2基因序列,设计并合成特异性的小干扰片段,并将其定向克隆到带有卡那霉素抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1中,对重组质粒进行酶切分析和DNA序列测定。用脂质体将重组质粒转染到HEK293细胞中,观察其在mRNA和蛋白水平对MCHR2的影响。结果通过酶切鉴定和序列测定,成功构建四条表达短发夹RNA的质粒及其阴性对照质粒,并成功转
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