鲑鱼降钙素基因在大肠杆菌中的克隆与表达

来源 :生物化学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ntfan

【摘要】

：

以鲑鱼基因组ＤＮＡ为模板，采用ＰＣＲ获得ｓＣＴ基因，并为ＤＮＡ序列分析所证实。以ｐＧＥＸ－３Ｘ为表达载体，利用体外定点突变技术成功地构建了融合蛋白ＧＳＴ－ｓＣＴ的重组表达质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ－ｓＣＴ，在大肠杆菌中得到高效表达，其表达量约为菌体总蛋

【作者】

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杜清友赵明

【机构】

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军事医学科学院基础医学研究所

【出处】

：

生物化学杂志

【发表日期】

：

1997年5期

【关键词】

：

降钙素基因克隆表达基因工程 Calcitonin Gene clone Expression Fusion protein

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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以鲑鱼基因组ＤＮＡ为模板，采用ＰＣＲ获得ｓＣＴ基因，并为ＤＮＡ序列分析所证实。以ｐＧＥＸ－３Ｘ为表达载体，利用体外定点突变技术成功地构建了融合蛋白ＧＳＴ－ｓＣＴ的重组表达质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ－ｓＣＴ，在大肠杆菌中得到高效表达，其表达量约为菌体总蛋白的３０％；利用亲合层析法对融合蛋白ＧＳＴ－ｓＣＴ进行纯化，再经ＦａｃｔｏｒＸａ酶切后获得了重组ｓＣＴ，并对其进行活性检测。初步实验证明，重组ｓＣＴ具有较

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