探讨肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞对食管癌细胞干性的影响以及阿司匹林抗肿瘤的潜在机制。
方法按照不同处理情况分组,分为对照组、ASA组、KYSE-450与M2共孵育组(KYSE-450+M2组)、KYSE-450与M2共孵育+ASA组(KYSE-450+M2+ASA组)、M2与shCCL2-KYSE450共孵育组(M2+shCCL2-KYSE450组)、M2与shCCL2-KYSE450共孵育+ASA组(M2+ shCCL2-KYSE450+ASA组)、M2与shCCL2-KYSE450共孵育组(M2+shCCL2-KYSE450组)、M2与shCCL2-KYSE450共孵育+ASA组(M2+shCCL2-KYSE450+ASA组)。采用细胞成球实验检测阿司匹林对KYSE-450成球能力的影响。采用实时荧光定量PCR、Western blot法和流式细胞术检测阿司匹林处理各组KYSE-450细胞后,KYSE-450细胞中不同趋化因子、干性基因Nanog和细胞表面干性指标CD90表达的差异。
结果ASA组和KYSE-450+M2组细胞的成球数目分别为(7.00±1.23)个和(34.33±2.33)个,与对照组[(14.50±2.33)个]比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。KYSE-450+M2+ASA组细胞的成球数目为(20.67±2.33)个,与KYSE-450+M2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组和ASA组细胞中Nanog基因的表达水平分别为1.00和0.50±0.10,差异有统计学意义(P<0.05)。KYSE-450+M2组和M2+KYSE-450+ASA组细胞中Nanog基因的表达水平分别为1.74±0.13和1.43±0.05,差异有统计学意义(P<0.05)。M2+shCCL2-KYSE450+ASA组和M2+shCCL2-KYSE450组细胞中Nanog基因的表达水平分别1.22±0.11和1.17±0.08,差异无统计学意义(P=0.69)。流式细胞术检测结果显示,对照组和ASA组细胞中CD90的表达水平分别为(2.93±0.52)%和(1.30±0.17)%,差异有统计学意义(P<0.05)。M2+shCCL2-KYSE450组和M2+shCCL2-KYSE450+ASA组细胞中CD90的表达水平分别为(4.07±0.12)%和(4.73±0.38)%,差异无统计学意义(P=0.17)。
结论阿司匹林通过降低食管癌细胞CCL2的表达,逆转肿瘤相关巨噬细胞对肿瘤细胞干性基因的上调作用,从而发挥其抗肿瘤作用。