【摘 要】
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目的:构建人膜联蛋白ⅤcDNA的原核表达载体并诱导其表达.方法:利用RT-PCR技术从人胎盘组织总RNA扩增膜联蛋白Ⅴ基因的编码序列,将扩增产物克隆至GST融合表达载体pGEX-2T,以IP
【机 构】
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南京军区福州总医院解放军医学检验中心实验科
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目的:构建人膜联蛋白ⅤcDNA的原核表达载体并诱导其表达.方法:利用RT-PCR技术从人胎盘组织总RNA扩增膜联蛋白Ⅴ基因的编码序列,将扩增产物克隆至GST融合表达载体pGEX-2T,以IPTG诱导GST融合人膜联蛋白Ⅴ的表达.结果:凝胶电泳显示人胎盘组织PCR扩增产物的分子质量大小与目的片段大小相符.对重组质粒分析表明,插入片段的序列与发表的人膜联蛋白Ⅴ基因编码序列一致.在IPTG的诱导下,BL21重组菌高效表达出一个相对分子质量约为60000的产物.结论:人膜联蛋白Ⅴ编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-2T.
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