牛源整合素β1亚基的克隆及表达载体的构建

来源 :甘肃农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:linkageldap
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参照已公布整合素β1亚基的基因组序列,设计并合成了对克隆引物,以RT—PCR方法从牛肺组织扩增出约2400bp的β1基因。经回收纯化连人PGEM--T载体。测序.依照测序结果设计1对原核表达引物。1对真核表达引物,分别以克隆载体PGEMβ1为模板扩增目的片段,经相应的EcoRI、XhoI和EcoRI、XbaI酶切纯化后,在T4DNA连接酶的作用下,定向亚克隆到原核表达载体pET--28a和真核表达载体pCDNA3.1zero(+)中,PCR、酶切鉴定及序列测定表明。成功构建了β1亚基原核表达载体pETβ1
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