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目的 探讨慢病毒介导下干涉酪氨酸激酶B(TrkB)表达对乳腺癌细胞SK-BR-3增殖的影响及其作用机制.方法 对MCF-7、BCAP-37、SK-BR-3和MDA-MB231乳腺癌细胞进行筛选,选取TrkB表达
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目的 探讨慢病毒介导下干涉酪氨酸激酶B(TrkB)表达对乳腺癌细胞SK-BR-3增殖的影响及其作用机制.方法 对MCF-7、BCAP-37、SK-BR-3和MDA-MB231乳腺癌细胞进行筛选,选取TrkB表达水平相对较高的细胞进行慢病毒感染以干涉TrkB表达,构建稳定干涉TrkB的乳腺癌细胞系Lv-sh-TrkB,通过蛋白质印迹(Western blot)实验检测TrkB干涉效果,同时构建乱序干涉细胞系Lv-scramble.采用噻唑蓝方法、流式细胞仪检测干涉TrkB后细胞的增殖情况以及细胞周期变化.结果 4株乳腺癌细胞中,SK-BR-3细胞TrkB表达水平相对较高,通过慢病毒感染SK-BR-3细胞后筛选稳定干涉TrkB表达的细胞株Lv-sh-TrkB,Western blot实验结果表明,Lv-sh-TrkB细胞中TrkB表达水平明显低于空白对照和Lv-scramble 细胞.细胞增殖检测表明Lv-sh-TrkB细胞增殖速度明显低于空白对照和Lv-scramble细胞;流式细胞仪检测细胞周期结果显示Lv-sh-TrkB细胞发生G1期阻滞,空白对照、Lv-scramble和Lv-sh-TrkB细胞G1期比例分别为61％、62％和78％.结论 干涉TrkB基因后乳腺癌细胞SK-BR-3增殖受到明显抑制,细胞周期发生G1期阻滞.
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