【摘 要】
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目的克隆人Tim-3基因5’端非编码区处具有启动子活性的片段，构建其真核报告质粒，为进一步研究Tim-3表达调控奠定基础。方法以人基因组DNA为模板，针对人Tim-3启动子5’端非编码区
【基金项目】
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国家自然科学基金资助课题（30670966）.
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目的克隆人Tim-3基因5’端非编码区处具有启动子活性的片段，构建其真核报告质粒，为进一步研究Tim-3表达调控奠定基础。方法以人基因组DNA为模板，针对人Tim-3启动子5’端非编码区处包括翻译起始点ATG和转录起始点TSS在内的-898～＋242片段。设计特异性引物，PcR扩增该片段，命名为Tim-3P2，经双酶切后克隆入pGL3-Basic载体SaeⅠ、XhoⅠ位点，构建pGL3-Tim-3P2荧光素酶报告质粒，与内参照pRL-TK用脂质体法瞬时共转染COS-7、RAW264．7和B16细胞系。通过
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