【摘 要】
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目的建立一种环境水体中空肠弯曲杆菌的荧光定量PCR准确快速方法。方法采用膜吸附-洗脱法浓缩富集环境水体中的空肠弯曲杆菌,根据空肠弯曲杆菌VS1基因序列设计引物,以构建的
【机 构】
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解放军后勤工程学院军事油料应用与管理工程系,国防建筑规划与环境工程系,
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目的建立一种环境水体中空肠弯曲杆菌的荧光定量PCR准确快速方法。方法采用膜吸附-洗脱法浓缩富集环境水体中的空肠弯曲杆菌,根据空肠弯曲杆菌VS1基因序列设计引物,以构建的空肠弯曲杆菌重组质粒作为标准品,建立空肠弯曲杆菌荧光定量PCR检测方法。结果荧光定量PCR反应体系在2.66×109～2.66×100copies/μl拷贝数模板量的线性范围内,所获得回归方程线性关系较好(R2=0.998),扩增曲线呈S形指数增长;特异性检测中肠炎沙门氏菌等对照菌扩增呈阴性,对于空肠弯曲杆菌纯培养物检测限达到46 cfu/ml,实际水样检测结果与常规生化鉴定结果一致,整个检测过程可以在4 h内完成。结论本研究中建立的空肠弯曲杆菌荧光定量PCR检测方法具有准确、简便、快速等特点,具有较强的实际应用价值,可以用于环境水体中空肠弯曲杆菌的检测。
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