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目的 改进心肌细胞的原代培养方法，提高心肌细胞收获率和存活率。方法 使用Ⅱ型胶原酶、胰蛋白酶分次消化心脏组织，差速贴壁分离法和化学试剂抑制法纯化心肌细胞。结果 8h后少数细胞出现自发性搏动；24h心肌细胞几乎全部贴壁，第1-3天形成细胞簇或细胞单层，心肌细胞收缩明显而有力。结论 胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶配合使用可以分离获得形态、活力良好的心肌细胞。