【摘 要】
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目的:探讨加减薯蓣丸对阿尔茨海默病（AD）小鼠学习记忆能力减退的作用及相关机制。方法:将40只5月龄SPF级APP/PS1小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组、加减薯蓣丸组、加减薯蓣丸+氯喹（CQ）组,每组10只,同背景野生型C57BL/6J小鼠10只设定为正常组。其中加减薯蓣丸组予以加减薯蓣丸煎剂(10 g·kg-1)灌胃,多奈哌齐组予以盐酸多奈哌齐溶液(0.45 mg·kg-1)灌胃,加减薯蓣丸+C
【基金项目】
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湖北省自然科学基金重点项目（2015CFA089）； 湖北省中医院老年呆病“五专”项目；
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目的:探讨加减薯蓣丸对阿尔茨海默病（AD）小鼠学习记忆能力减退的作用及相关机制。方法:将40只5月龄SPF级APP/PS1小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组、加减薯蓣丸组、加减薯蓣丸+氯喹（CQ）组,每组10只,同背景野生型C57BL/6J小鼠10只设定为正常组。其中加减薯蓣丸组予以加减薯蓣丸煎剂(10 g·kg-1)灌胃,多奈哌齐组予以盐酸多奈哌齐溶液(0.45 mg·kg-1)灌胃,加减薯蓣丸+CQ组则在加减薯蓣丸组基础上予以CQ(10 mg·kg-1)腹腔注射1次,与灌胃同时进行,正常组与模型组予以等量生理盐水灌胃,1次/d,共35 d。给药结束后,Morris水迷宫实验和新物体识别实验检测小鼠空间记忆能力;原位末端标记法（TUNEL）染色检测小鼠海马CA1神经元凋亡水平;生化检测小鼠海马神经元活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）水平;透射电镜观察小鼠海马CA1区神经元线粒体超微结构;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠海马线粒体自噬接头蛋白（p62）、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）、PTEN诱导激酶1（PINK1）、E3泛素连接酶（Parkin）蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小鼠海马线粒体叉头状转录因子O1（FoxO1）、PINK1、Parkin mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显增长,穿越平台次数及目标象限滞留时间占比明显减少,相对分辨指数明显降低,识别新物体能力减弱（P＜0.05）;海马CA1区神经元凋亡细胞明显增多（P＜0.05）;ROS水平显著升高（P＜0.01）,SOD水平显著降低（P＜0.01）;海马线粒体形态严重损伤;p62、LC3Ⅱ蛋白表达显著增多（P＜0.01）,Parkin蛋白表达明显减少（P＜0.05）,PINK1蛋白表达增多（P＜0.05）;FoxO1、PINK1、Parkin mRNA表达均减少（P＜0.05）。与模型组比较,经加减薯蓣丸干预后小鼠逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数及目标象限滞留时间占比明显增多,相对分辨指数显著升高,识别新物体能力增强（P＜0.05）;凋亡细胞明显减少（P＜0.05）;ROS水平显著降低（P＜0.01）,SOD水平明显升高（P＜0.05,P＜0.01）;线粒体形态及各结构改善明显;p62、LC3Ⅱ蛋白表达明显减少（P＜0.05,P＜0.01）,PINK1、Parkin蛋白表达增多（P＜0.01）;FoxO1、PINK1、Parkin mRNA表达明显升高（P＜0.05,P＜0.01）。与加减薯蓣丸组比较,加减薯蓣丸+CQ组小鼠逃避潜伏期明显增长,穿越平台次数及目标象限滞留时间占比减少,相对分辨指数减少（P＜0.05）;SOD水平明显降低（P＜0.01）;线粒体形态结构损伤度再次加重;p62、LC3Ⅱ蛋白表达明显增多（P＜0.05,P＜0.01）,PINK1、Parkin表达明显减少（P＜0.05,P＜0.01）;FoxO1、PINK1、Parkin mRNA表达明显减低（P＜0.05,P＜0.01）。结论:加减薯蓣丸能有效改善AD小鼠氧化应激损伤及学习记忆能力,其机制可能与上调FoxO1,PINK1,Parkin因子的表达,促进线粒体自噬,减轻氧化应激反应,保护神经元损伤有关。
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