【摘 要】
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目的：研究hsa-miR-200b对人U251胶质瘤细胞增殖的影响及相关作用机制.
方法：将miR-200b过表达和表达沉默质粒分别稳定转染至胶质瘤U251细胞,qRT-PCR验证转染效率,CCK-8法检
【机 构】
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中国医科大学盛京医院神经外科,辽宁沈阳110004
【出 处】
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中国解剖学会护理解剖学分会第十三届学术年会
论文部分内容阅读
目的：研究hsa-miR-200b对人U251胶质瘤细胞增殖的影响及相关作用机制.
方法：将miR-200b过表达和表达沉默质粒分别稳定转染至胶质瘤U251细胞,qRT-PCR验证转染效率,CCK-8法检测U251细胞增殖水平变化,qRT-PCR以及Western blot方法检测的CRKL的mRNA和蛋白表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-200b与CRKL基因3UTR的结合位点.将CRKL过表达和表达沉默质粒载体分别稳定转染至U251胶质瘤细胞,使用CCK-8法检测U251细胞增殖水平变化.分别建立miR-200b和CRKL的稳定双转染U251细胞系,使用CCK-8法检测对各组细胞增殖水平的变化.
结果：与对照组相比,miR-200b过表达显著抑制胶质瘤U251细胞的增殖并且抑制CRKL在U251胶质瘤细胞的mRNA和蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证了miR-200b与CRKL基因3UTR的结合位点;CRKL过表达显著增强胶质瘤U251细胞增殖能力;CRKL过表达有效阻断了miR-200b抑制胶质瘤U251细胞增殖的作用.
结论：miR-200b能够通过靶向下调CRKL抑制胶质瘤U251细胞增殖.
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