融合蛋白表达质粒pUL54S-EGFP的构建及在AD293细胞中的表达

来源 :浙江医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunjun
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目的探讨构建人巨细胞病毒(HCMV)截短UL54(UL54S)基因融合增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒pUL54S—EGFP转染人胚肾293细胞,瞬时表达UL54S和EGFP的可行性。方法采用PCR法扩增UL54s基因并将其克隆入真核表达载体pEGFP—N1中,采用脂质体法转染AD293细胞后通过荧光显微镜和流式细胞仪分析EGFP的表达情况。结果重组质粒pUL54S—EGFP转染AD293细胞12h后即可见到荧光蛋白的表达,至48h表达达高峰;转染48hpUL54S—EGFP组平均转染率为47%,平
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