【摘 要】
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利用免疫共沉淀技术验证丝切蛋白(CFL2)和肌细胞增强因子-2 (MEF2C)之间的相互作用关系.构建带绿色荧光蛋白(GFP)的pEGFP-N1-CFL2和pLenti6.3_ MCS_ IRES2-EGFP-his-MEF2C重
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利用免疫共沉淀技术验证丝切蛋白(CFL2)和肌细胞增强因子-2 (MEF2C)之间的相互作用关系.构建带绿色荧光蛋白(GFP)的pEGFP-N1-CFL2和pLenti6.3_ MCS_ IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体,经双酶切鉴定正确后,分别将上述重组载体共转染至人宫颈癌细胞(Hela),利用免疫共沉淀方法验证CFL2和MEF2C之间的相互作用关系.结果表明,pEGFP-N1-CFL2和pLenti6.3_ MCS_ IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体共转染Hela细胞,分别用抗CFL2和抗MEF2C抗体沉淀蛋白复合物,用MEF2C和CFL2抗体进行Westem blot检测,检测到pLenti6.3_ MCS_ IRES2-EGFP-his-MEF2C和pEGFP-N1-CFL2的表达.本试验成功构建pEGFP-N1-CFL2和pLenti6.3_ MCS_ IRES2-EGFP-his-MEF2C真核表达重组载体,在Hela细胞中表达后利用免疫共沉淀的方法证实了CFL2和MEF2C之间存在相互作用.
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