【摘 要】
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[目的]探索利用大肠杆菌进行丝氨酸蛋白酶PL基因的克隆与表达及抗血清制备的方法。[方法]根据报道的PL蛋白基因序列设计1对引物,通过RT-PCR扩增获得PL基因片段,对重组载体进
【机 构】
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重庆文理学院生命科学系,重庆文理学院生物化学与环境科学系,中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
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[目的]探索利用大肠杆菌进行丝氨酸蛋白酶PL基因的克隆与表达及抗血清制备的方法。[方法]根据报道的PL蛋白基因序列设计1对引物,通过RT-PCR扩增获得PL基因片段,对重组载体进行构建、鉴定和序列分析,用表达的特异蛋白条带制备抗原,免疫家兔制备抗血清。[结果]通过RT-PCR扩增得到长约850 bp的PL基因片段,将其克隆到原核表达载体pET-22b（＋）中,获得的重组子pET-22b-PL转化E.coliBL21（DE3）,经最终浓度为1 mmol/L IPTG诱导37℃培养4 h,获得约31 kDa大
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