插入失活法构建2型猪链球菌突变株

来源 :中国食品卫生杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：t6293003

【摘要】

：

目的构建2型猪链球菌突变株05ZY△0913，05Zy△0936。方法以05ZY为模版，分别扩增0913、0936基因内部504bp，549bp片段为同源臂，与pSET4S质粒进行连接，将连接产物转入DH5a感受态细胞

【作者】

：

路玲玲李蓉李文君袁媛郑玉玲王恒樑姜永强

【机构】

：

中国疾病预防控制中心营养与食品安全所,军事医学科学院病原微生物生物安全国家重点实验室

【出处】

：

中国食品卫生杂志

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

：

链球菌猪基因沉默诱变插入 Streptococcus suis Gene Silencing Mutagenesis Insertional

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目的构建2型猪链球菌突变株05ZY△0913，05Zy△0936。方法以05ZY为模版，分别扩增0913、0936基因内部504bp，549bp片段为同源臂，与pSET4S质粒进行连接，将连接产物转入DH5a感受态细胞中，构建载体0913-pSET4S，0936-psET4S。然后利用插入失活法，将构建的0913-pSET4S、0936-pSET4S载体通过电转化导入2型猪链球菌的感受态细胞中，利用壮观霉素抗性筛选得到阳性转化子，并用PCR进行鉴定。结果筛选到的菌株均能抵抗100μg／ml壮观霉素，经PC

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