肠出血型大肠埃希菌O157：H7 ppk基因缺失株的构建及其生物学特性分析

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：a351200

【摘要】

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目的：利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌（EHEC）O157：H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物，每条引物5＆#39;端与ppk基因同源，3＆#39;端与卡那霉素抗

【作者】

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韩朋孙琦赵素慧张其威万成松

【机构】

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南方医科大学公共卫生与热带医学学院BSL-3实验室

【出处】

：

南方医科大学学报

【发表日期】

：

2014年6期

【关键词】

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EHEC O157 H7 ppk基因 RED重组系统基因突变 enterohemorrhagic Escherichia coli O157：H7 ppk

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目的：利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌（EHEC）O157：H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物，每条引物5＆#39;端与ppk基因同源，3＆#39;端与卡那霉素抗性基因同源，扩增卡那霉素抗性基因片段；制备含有pKD46质粒的EHEC O157：H7 EDL933w感受态细菌，然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中；利用pKD46介导的Red重组系统，通过同源重组替换EHEC O157：H7 EDL933w ppk基因，PCR和测序验证；通过革兰染色、测

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