【摘 要】
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为研究花生小GTP结合蛋白基因AhRabG3f对盐胁迫响应的分子机制,文中克隆了花生AhRabG3f基因起始密码子上游1 914 bp的启动子片段(3f-P)。将该启动子5’末端截短获得5个片段(3f-P1—3f-P5),长度分别为1 729、1 379、666、510和179 bp。将这6个启动子片段与gus基因融合的植物表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草。对转基因烟草进行GUS表达分析和酶活性
【机 构】
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青岛农业大学农学院山东省旱作重点实验室山东省花生产业协同创新中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(31872875); 山东省自然基金(ZR2020QC120); 青岛农业大学研究生创新计划项目(QNYCX20024);
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为研究花生小GTP结合蛋白基因AhRabG3f对盐胁迫响应的分子机制,文中克隆了花生AhRabG3f基因起始密码子上游1 914 bp的启动子片段(3f-P)。将该启动子5’末端截短获得5个片段(3f-P1—3f-P5),长度分别为1 729、1 379、666、510和179 bp。将这6个启动子片段与gus基因融合的植物表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草。对转基因烟草进行GUS表达分析和酶活性检测,结果表明:在转入各启动子片段的烟草中,都能检测到gus基因的表达,其中全长启动子3f-P的驱动活性最弱,而截短片段3f-P3的驱动活性最强。对转基因烟草进行盐胁迫处理后,3f-P、3f-P1、3f-P2和3f-P3所驱动GUS酶活性是未经盐诱导的3.3、1.2、1.9和1.2倍,表明AhRabG3f启动子是盐诱导型的,在3f-P至3f-P3之间可能存在对盐响应的正调控元件。通过对盐胁迫处理后,各启动子片段驱动的GUS活性分析,推测在AhRabG3f启动子上游1 930—1 745 bp、682–526 bp之间存在可能对盐响应的正调控元件MYB、GT1和TC-rich repeat,1 395—682 bp之间存在可能对盐响应的负调控元件MYC。研究结果可为利用诱导型启动子调控花生的耐盐性提供理论依据。
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